محققان شرکت سام فارمد پترو سام
مقاله ای در رابطه با مراحل ساخت محیط کشت میکروبی آماده کرده اند تا شما عزیزان اطلاعات کامل تری را بدست آورید.
مراحل ساخت محیط کشت میکروبی موضوعی است که در مقاله امروز قصد داریم، در مورد آن صحبت کنیم. محیط‌های کشت، در امور آزمایشگاهی نقش بسیار حساس و مهمی را ایفا می‌کنند.
از این محیط‌ها در جهت شناخت عوامل بیماری‌زا مانند میکروب‌ها استفاده می‌شود.
اگر محققان بخواهند که محیط کشت آن‌ها، نتیجه مطلوب و قابل استنادی داشته باشد، باید از روش‌های مختلف کنترل کیفی استفاده نمایند.
روش‌های کنترل کیفی در روند ساخت محیط کشت شامل معیارهای متفاوتی است که در ادامه مقاله، به آن می‌پردازیم.
بررسی محیط کشت میکروبی
درواقع، برای شناخت عوامل میکروبی و علت گونه‌های مختلف بیماری‌های عفونی، از محیط‌های کشت استفاده می‌کنند.
اگر بخواهم موضوع را به زبانی ساده‌تر بیان کنم، باید اشاره‌کنم که در کشت گلو، بخشی از پوشش بافتی قسمت پشت گلو را جدا می‌کنند و سپس، نمونه موردنظر را در محیط بررسی می‌کنند؛ بنابراین پژوهشگران با مطالعه این نمونه، میکروارگانیسم‌هایی که برای گلو مضرند و همچنین عوامل ایجاد آن‌ها را تشخیص می‌دهند.
بررسی باکتری‌های محیط کشت
کاربرد متفاوت کشت باکتری‌ها
باکتری‌ها روی هر چیزی که شما فکرش را کنید، وجود دارند. این میکروب‌ها هم در بدن انسان و هم در محیط‌های مختلف زندگی می‌کنند. به دلیل وجود انواع گوناگون باکتری‌ها در یک محیط، برای انجام آزمایشات و بررسی آن‌ها باید مراحل ساخت محیط کشت میکروبی را انجام دهیم.
بنابراین اگر بخواهیم باکتری موردنظر خود را از جهات مختلف فیزیولوژیکی، کشت و ریخت‌شناسی بررسی کنیم، باید آن‌ها را از سایر باکتری‌های موجود در محیط جدا کنیم. با جداسازی باکتری‌ها از یکدیگر راحت‌تر می‌توان، عامل ایجاد بیماری را تشخیص داد. برخی از این باکتری‌هایی که در بدن انسان هستند، به‌محض ورود عوامل بیماری‌زا و مهاجم، فلور طبیعی می‌سازند و با آن‌ها مبارزه می‌کنند.
برای خرید محیط کشت های میکروبی لطفا روی لینک کلیک کرده و سفارش خود را ثبت کنید تا کارشناسان فروش ما در کمترین زمان ممکن با شما تماس گرفته و سفارش شما را بررسی کنند.
انواع مختلف محیط‌های کشت میکروبی
در این بخش از مطلب قصد داریم، در مورد کلیت چند محیط مختلف کشت صحبت کنیم. پس در ادامه، با ما باشید.
مراحل ساخت محیط کشت مایع:
در این نوع کشت محیط فاقد ماده آگار (ماده‌ای که سبب انعقاد مواد در محیط کشت می‌شود) است، بنابراین کشت به‌صورت مایع انجام می‌گیرد. کشت مایع در فلاکس یا لوله‌آزمایش انجام می‌شود و در جهت بررسی پروسه‌های تخمیری و رشد باکتری‌ها کاربرد دارد.
محیط کشت نیمه جامد:
در این محیط از درصد ناچیزی آگار استفاده می‌شود تا محیط به‌صورت نیمه جامد آماده شود. محیط‌های کشت نیمه جامد، به‌صورت محیط انتقالی کاربرد دارند.
محیط کشت جامد:
در مراحل ساخت محیط کشت جامد، از آگار استفاده می‌شود.
تشکیل کلونی، ویژگی باکتری‌ها و تعداد آن‌ها همگی از مواردی هستند که در این محیط موردبررسی قرار می‌‌گیرند. مراحل ساخت محیط کشت میکروبی جامد، در لوله‌آزمایش و ظرف‌های پلیت انجام می‌شود.
نکته‌ای که در خصوص مراحل ساخت محیط کشت وجود دارد، این است که باکتری‌ها در کدام محیط بهتر رشد می‌کنند. مثلاً مایکوباکتریوم در محیط مایع بسیار سریع‌تر از محیط جامد رشد می‌کند.
انجام آزمایشات گوناگون بر روی باکتری‌ها
رشد باکتری در محیط کشت سلولی
جالب است بدانید که امکان رشد برخی از گونه‌های میکروارگانیسم، تنها در سلول زنده فراهم است. به همین جهت، باید آن‌ها را در محیط کشت سلولی تولید نمود. در برخی از گونه‌ها سلول پیش از آن‌که به‌وسیله باکتری آلوده شود، کشت داده می‌شود. در گام بعدی با استفاده کردن از گیرنده‌های مخصوص و آلوده کردن محیط سلولی توسط باکتری‌ها، می‌توان آن‌ها را از یکدیگر شناسایی نمود.
مراحل ساخت محیط کشت مناسب
امروزه، با پیشرفت تکنولوژی، اغلب محیط‌های کشت به‌صورت آماده و پودری وجود دارند.
در گام اول، برای تهیه محیط کشت باید درصد مشخصی از محیط را با میزان معینی از آب مقطر ترکیب کنید.
پس فراموش نکنید که برای انجام مراحل ساخت محیط کشت جامد باید آگار را در ابتدا در مخلوط حل کنید.
در ادامه مراحل ساخت محیط کشت میکروبی پس از ترکیب کردن آب و پودر باید محلول به‌دست‌آمده را ظرف مدت یک دقیقه بجوشانید تا محیط آن به‌طور کامل شفاف شود.
نکته‌ای که باید به آن توجه کنید، این است که در هنگام جوشاندن محلول، برای جلوگیری از ته گرفتن آگار یا سوختن آن مرتب مخلوط را هم بزنید.
حال باید با اتوکلاو محیط را سترون کرد.
البته این مورد در همه‌ی محیط‌ها کاربرد ندارد.
چنانچه بخواهیم کشت را در پلیت انجام دهیم، باید ظرف مدت 15 تا 20 دقیقه محیط درون اتوکلاو را استریل کنیم.
حالا با خارج کردن محیط کشت از اتوکلاو باید صبر کنیم تا دمای آن حدود 45 الی 50 درجه پایین‌تر بیاید.
در گام بعدی با انجام شرایط سترون در کنار شعله، محیط را در هر یک از پلیت‌ها به میزان 10 تا 15 سی‌سی می‌ریزیم.
در انتها، باید درون هر پلیت را با شعله تیز شعله دهی نماییم.
این کار برای خارج نمودن حباب‌های هوا صورت می‌گیرد.
مراحل ساخت محیط‌های مختلف
تهیه محیط کشت در لوله‌آزمایش
در این نوع کشت، باید بعد از این‌که میزان مشخصی از آب مقطر و پودر را در ارلن حل کردیم، آن‌ها را حرارت دهیم.
برای انجام ادامه مراحل ساخت محیط کشت میکروبی نیز محیط را در چند لوله مختلف قرار می‌دهیم.
برای این کار باید جوری محیط کشت را در لوله‌ها بریزیم که حدود یک‌سوم آن‌ها پر شود و سپس آن‌ها را درون اتوکلاو قرار دهیم.
برای تهیه محیط به‌صورت آگار شیب‌دار، باید پس از خروج لوله‌ها از اتوکلاو آن‌ها را به‌صورت مورب قرار دهید تا محیط کشت در همان حالت بسته شود.
حال چنانچه بخواهید، یک محیط آگارتال تهیه کنید، لازم است در این مرحله لوله‌ها را در حالت عمودی قرار دهید تا محیط کشت ببندد.
محقق همواره باید این نکته را در نظر بگیرد که میکروب را در هر محیطی بخواهیم کشت بدهیم، باید دهانه لوله را به‌وسیله پنبه ببندیم.
پنبه باید به صورتی در لوله قرار گیرد که نیمی از آن درون لوله و نیم دیگر بیرون از آن باشد.
ساخت محیط‌های کشت گوناگون
جمع‌بندی
مراحل ساخت محیط کشت میکروبی موضوعی بود که در مقاله امروز آن را به‌صورت کامل بررسی کردیم.
این کار نکات و حساسیت‌های زیادی دارد؛ بنابراین باید در حین انجام آن دقت لازم را به کار برد.
در این مطلب سعی کردیم، مراحل ساخت محیط کشت مایع، نیمه جامد و جامد را بررسی کنیم.
همان‌طور که مشاهده کردید، هر یک از این روش‌ها برخی تفاوت‌های جزئی با یکدیگر دارند.
که باید بر اساس باکتری‌های مورد کشت و محیط مناسب رشد آن‌ها انتخاب شوند.
منابع:
2.faradars